技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 微量分光光度計原理
微量分光光度計原理
更新時間:2023-05-09   點擊次數:1206次

微量分光光度計原理及應用

   微量分光光度計能夠快速準確的定量檢測核酸、蛋白質等溶液。具有使用方便、消耗樣品少(僅2μl)、不用預熱、能迅速清理殘留樣品、不需要比色皿或其它樣品定位裝置、樣品不需要稀釋等特點,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量,目前已成為眾多實驗室的常規儀器。

  工作原理

  超微量分光光度計進行濃度測定的原理是根據朗伯-比爾(Lamber-Beer)定律,

A=K·C·L

   式中,A為吸光度;K為吸(消)光系數;C為溶液的濃度;L為液層厚度。此公式說明:在入射光一定時,溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數學表達式,又叫朗伯-比爾定律。

  核酸定量

  核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率最高的功能??梢远繙y定溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA以及RNA含量。這是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵,具有紫外吸收的特性,最大的吸收波長在260nm,吸收波谷在230nm。

  除了核酸濃度,分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

  蛋白質直接定量

  這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。

  比色法蛋白質定量

  蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。

  比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等幾種方法。

上海旦鼎國際貿易有限公司

上海旦鼎國際貿易有限公司

地址:上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄3號2994室

主營產品:真空泵,離心機,液氮罐,制冰機,*聲波清洗機,食品安全檢測儀,磁力攪拌器,旋轉蒸發儀,移液器

©2019 版權所有:上海旦鼎國際貿易有限公司  備案號:滬ICP備10210192號-3  總訪問量:1093472  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 日本欧美大码aⅴ在线播放| 国产成人三级经典中文| 国产一二三视频| 亚洲天堂电影在线观看| 亚洲国产精品久久久久婷婷软件 | 亚洲黄色性视频| 久久精品aⅴ无码中文字字幕重口| 久久精品视频久久| 一区二区视频在线播放| 韩国成人在线视频| 美女羞羞视频网站| 男女啪啪进出阳道猛进| 日韩欧美综合视频| 国产精品无码一本二本三本色| 国产喷水女王在线播放| 人妻精品久久久久中文字幕一冢本| 亚洲欧美成人一区二区在线电影| 亚洲中文字幕av在天堂| 久久精品国产清白在天天线| 24小时日本韩国高清免费| 青娱乐国产精品| 欧美疯狂性受xxxxx另类| 天堂在线免费观看mv| 别揉我的胸~啊~嗯~| 免费大黄网站在线观看| 久久精品无码一区二区三区免费| 99国产精品免费观看视频| 1204国产成人精品视频| 看全色黄大色黄女片爽毛片| 成人在线综合网| 国产一区二区三区日韩欧美| 亚洲午夜国产精品| a在线观看免费视频| 粗大的内捧猛烈进出在线视频| 最近免费高清版电影在线观看 | 成人国产精品免费视频| 国产精品国产香蕉在线观看网 | 又色又污又爽又黄的网站| 久久精品国产99久久丝袜| ssss国产在线观看| 色婷婷中文字幕|